高效包裝腺相關病毒的原理及流程_風聞
源井生物-让基因编辑更简单！2020-04-15 11:08
高效轉染病毒
源井生物可以提供不同質量標準的慢病毒，腺病毒，腺相關病毒。在基因編輯方面，提供體外細胞感染用的濃縮病毒，也可以提供動物體內使用的超純化病毒，滿足各種不同科研需求。
三種病毒的比對:
腺相關病毒( adeno-associated virus，AAV) 是一類細小病毒，基因組為單鏈DNA，對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。通常需要腺病毒或皰疹病毒幫助其在體內複製擴增。重組腺相關病毒（recombinant AAV, rAAV）是利用AAV2 型基因組與不同血清型的衣殼蛋白基因組結合產生的混合體病毒載體，可將目的基因的CDS 區序列或者RNAi 干擾序列插入rAAV 表達質粒中，包裝病毒後感染細胞完成對目的基因的操作。腺相關病毒具有感染温和，免疫原性小，長效穩定表達的特點，主要應用於動物體內注射。
腺相關病毒顆粒經過超速離心純化，並通過qPCR對病毒基因拷貝進行滴定。腺相關病毒的滴度在10^12~10^13GC/ml，可以滿足各類整體實驗的使用要求。
不同血清型的AAV組織感染嗜親性各不相同，表現出一定的器官靶向特異性。下表列舉了不同的AAV血清型及對應的組織親和性:
構建基因敲除腺相關病毒載體幷包裝為腺相關病毒，經過超速離心純化後，可用於動物定位注射和整體注射實驗。細胞感染腺相關病毒後，可穩定表達gRNA和Cas9蛋白，達到敲除靶基因的目的。
基因敲除腺相關病毒載體選擇 ：
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