基因編輯助“八戒”跨界出道 異種器官移植離現實還有多遠

説到豬的價值，我們多會想到它是肉食的來源，但實際上，豬的價值遠不止如此。在科學家手中，豬就變成了可以進行人體器官移植、挽救臟器衰竭病人生命的科學工具。

為促進豬在醫學上更多的轉化應用，今年6月，國內首個醫用小型豬產學研繁育基地在四川內江國家農業科技園內落户，該基地總佔地面積約100畝，一期工程約10畝已建成，包含小型豬繁育的各功能區及手術室、實驗室等，是高標準的醫用豬試驗基地、器官供體工廠等。“經過基因編輯後，‘八戒’也將擁有如同大師兄孫悟空般的七十二變本領，將自己多個組織或器官‘變身’，為人類所用。”基地牽頭單位成都中科奧格生物科技有限公司首席科學家潘登科説，該基地將致力於國內醫用豬和器官移植供體基因編輯小型豬繁育、研究和應用轉化的新產業領域，建立醫用豬體系與標準，為器官移植和生物醫學作出貢獻。

豬為什麼能成為異種器官移植的首選供體？異種器官移植進入臨牀應用又要突破怎樣的瓶頸？豬的醫學化應用未來還將會有怎樣的發展？科技日報記者就此進行了相關採訪。

供體短缺嚴重 豬被科學界公認為最理想異種供體

治療終末期癌症病人的臟器功能衰竭，器官移植是首選方案，但在我國，等待器官移植和獲得器官移植的比例能達到30∶1，每年有幾十萬病人因等不到器官移植而死亡。“器官移植的瓶頸在於供體嚴重短缺，而目前這一問題最可行、最有效和最快速的解決途徑是異種器官移植。”潘登科説，異種器官移植的優勢在於器官供體來源充足，且可以批量化、工廠化生產，而同種移植的器官不僅數量緊缺，而且可能來自疾病終末期的病人，器官質量無法保證。

那為什麼選擇豬作為異種器官移植的供體呢？

“人類屬靈長類動物，雖然與其它靈長類動物如猴子、猩猩等在生理解剖、新陳代謝等方面相似，但靈長類動物世代間隙長，繁殖率低，飼養成本較高，很難滿足人的器官移植需求；而且多數靈長類動物在國際上屬保護動物，不利於臨牀推廣。”潘登科説，豬不僅器官大小、解剖特徵、生理生化與人類非常相似，而且生長週期較短，繁殖率高，被科學界公認為異種器官移植的理想供體。

但在民間有句俗話，叫“羊肉貼不到狗身上”，異種器官移植的難點也正是如此。“豬雖然是最理想的異種器官移植供體，但豬器官移植到人體後，會發生多種免疫排斥反應，特別是超急性排斥反應讓移植器官在短時間內便喪失功能。”潘登科説，這是物種保持種系延續最天然的一種防禦，即使是人類親屬之間的器官，配型都可能不成功，更何況是豬跟人。

要讓豬的器官移植到人體內，讓人體願意接受這個“外來客”，首先必須解決異種器官移植排斥反應的問題，這成為技術上的一大挑戰。

敲除關鍵基因 豬腎臟移植具備臨牀試驗基礎

豬的器官與人的器官相比有什麼不同？通過找到這些不同，然後剔除這些不同，是否就可以讓豬的器官在人體里正常工作了呢？帶着這樣的思路，科學家研究發現，引起排斥反應的主要原因是人體內的天然抗體能識別出豬細胞表面的α-半乳糖苷酶（α-gal）、β-半乳糖苷酶（β-gal）和N-乙酰神經氨酸羥化酶（Neu5Gc蛋白），這3種蛋白分別由GGTA1、B4GalNT2和CMAH基因催化合成。“這是豬體內最容易引發人體免疫排斥反應的3個基因，如果把這些基因敲除，問題不就解決了嗎？”潘登科説，目前研究發現，只有將上述3個基因全部敲除，豬器官移植到人體後才幾乎不會有大的排斥反應，才具有進入臨牀試驗的基礎。

近些年來，潘登科團隊已經培育出無α-gal的基因敲除豬，並繁育6代以上；培育了無α-gal、β-gal的基因敲除豬；無α-gal、Neu5Gc的基因敲除豬。今年6月，研究團隊通過一次性基因編輯，針對豬B4GalNT2和CMAH基因構建敲除載體，並在團隊前期製備的GGTA1基因敲除豬體細胞上完成另外兩個基因的敲除，然後把敲除了這些基因的細胞放入卵子裏，通過電融合的方式把卵子激活，再將激活後正常發育的胚胎移植到母豬體內，讓母豬受孕，直至生育出敲除掉3個基因的克隆豬。

目前，這隻經過基因修飾的豬已經75日齡，研究人員將它的細胞和人的血清融合後檢測發現，該細胞異種抗原—抗體的結合和

補體介導的免疫排斥反應顯著降低，我國豬異種器官移植向臨牀試驗邁進一大步。

豬的器官移植到人體內如何保證安全？醫學產品在進入人體臨牀試驗前，都得在與人很接近的猴子身上進行臨牀前試驗。“我們把器官先移植給猴子，觀察記錄猴子的存活時間、反應狀況等，若能達到器官移植的安全性和有效性標準，才能申報臨牀試驗。”潘登科説。

2019年，潘登科團隊把培育的無α-gal且高表達人的補體激活抑制因子CD55的豬腎臟移植到非人靈長類恆河猴體內，完全採用人體臨牀免疫抑制劑，恆河猴腎移植術後存活時間達到32天，達到了同等免疫方案（即使用同等的人體臨牀免疫抑制劑）世界上異種腎臟移植的最長存活記錄。潘登科説，此次豬—猴腎移植的成功，標誌着中國異種器官腎臟移植的基因改造供體豬達到國際同類研究水平。

從農用到醫用 打造未來生物材料和器官工廠

國際上從1995年開始研究豬的異種器官移植，至今已積累了二十餘年的經驗。目前，豬的眼角膜、心臟瓣膜等組織工程產品已廣泛應用於人體臨牀，豬胰島細胞和皮膚異種移植已進入人體臨牀試驗階段，而豬的腎臟這種大器官的異種移植也已完成臨牀前試驗，具備開展人體臨牀試驗的基礎。據《科學》雜誌今年報道，豬的腎臟異種移植年內將進入人體臨牀試驗。

隨着豬異種器官移植臨牀前試驗和臨牀試驗的逐步實現，豬在醫學上的轉化應用受到更多關注。內江基因編輯豬產學研協同創新基地目前擁有10餘種共200多頭基因修飾豬。

“醫用豬試驗基地是轉化醫學應用非常重要的支撐環節，但之前我國在相關基地建設方面的缺失，成為制約豬轉化醫學應用的一個瓶頸。”潘登科説，建立醫用基因編輯小型豬試驗基地，就是為了利用良好的硬件和軟件優勢，進行基因編輯小型豬繁育及研究和應用轉化，打造生物材料和器官供體的批量化生產工廠，造福更多的患者。

“豬的農用價值眾所周知，在生物醫學領域，豬更渾身是寶，除了是異種器官移植的理想供體，還可以提供生物材料及製品，模擬研究人類疾病等。”潘登科介紹，隨着豬的醫學化應用越來越多，未來，國內還將陸續建立“醫用生物材料專用豬”基地，實現可溯源豬源生物材料的國內採購；建立“超潔淨級豬”基地，為各實驗單位、院校提供實驗用豬，為醫院批量提供安全乾淨的器官移植供體豬；還將作為模擬人類疾病的研究模型，開展醫療器械的小型豬評價，建立藥物的臨牀前大動物試驗平台。“將豬的醫用價值最大化呈現，這是一件造福全人類的事。”潘登科説。