細胞遷移和侵襲檢測方法和原理—源井生物_風聞

細胞遷移和侵襲Cell migration and invasion

細胞遷移 (cell migration) 也稱為細胞爬行、細胞移動或細胞運動，是指細胞在接收到遷移信號或感受到某些物質的梯度後而產生的移動。細胞遷移為細胞頭部偽足的延伸、新的黏附建立、細胞體尾部收縮在時空上的交替過程。細胞遷移是正常細胞的基本功能之一，是機體正常生長發育的生理過程，也是活細胞普遍存在的一種運動形式。胚胎髮育、血管生成、傷口癒合、免疫反應、炎症反應、動脈粥樣硬化、癌症轉移等過程中都涉及細胞遷移。

細胞侵襲（cell invasion）是指細胞通過細胞外基質從一個區域遷移到另一個區域的能力。細胞侵襲是正常細胞和癌細胞應對化學和機械刺激的反應。在遷移到新區域之前，細胞外基質被細胞內的蛋白酶降解。細胞侵襲常發生於傷口修復、血管形成和炎症反應以及組織的異常浸潤、腫瘤細胞轉移等過程中。

技術原理

檢測細胞遷移能力和侵襲能力常用的實驗手段是Transwell實驗。Transwell顧名思義是“穿孔實驗”，即將小室放入孔板中（常見的是24孔板），小室中含有密密麻麻的小孔，將細胞懸液加到小室中，小室放在加入完全培養基的24孔板內，細胞可通過形變穿過小室中的孔而跑到營養更豐富的小室外部並貼在外側。通過對小室外部的細胞進行染色計數，就可以判斷細胞的遷移與侵襲能力的強弱。Transwell的基本原理是將小室放入培養板中，小室內稱為上室，培養板內稱為下室，上下層培養液以聚碳酸酯膜相隔，上室內添加上層培養液，下室內添加下層培養液。將細胞種在上室內，由於膜有通透性，下層培養液中的成分可以影響到上室內的細胞，從而可以研究下層培養液中的成分對細胞生長、運動等的影響。

腫瘤遷移實驗：研究腫瘤細胞的遷移能力或特定情況下腫瘤細胞的遷移能力。常用8.0、12.0µm膜，上室種腫瘤細胞，下室加入FBS或某些特定的趨化因子，腫瘤細胞會向營養成分高的下室遷移，計數進入下室的細胞量可反映腫瘤細胞的遷移能力。

腫瘤侵襲實驗：研究腫瘤細胞的侵襲能力或特定情況下腫瘤細胞的侵襲能力。與腫瘤細胞遷移實驗不同的是，需在聚碳酸酯膜上側鋪一層基質膠，用以模仿細胞外基質，上室種腫瘤細胞，若細胞要進入下室，必須先分泌基質金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMPs）將基質膠分解，才能通過聚碳酸酯膜下室，計數進入下室的細胞量可反映腫瘤細胞的侵襲能力。

結果示例

A.人皮膚癌細胞A20578細胞遷移實驗結果示例

B.人皮膚癌細胞A20578細胞侵襲實驗結果示例