細胞週期檢測方法及原理—源井生物_風聞

細胞週期Cell Cycle

細胞週期(cell cycle)是指細胞從一次分裂完成開始到下一次分裂結束所經歷的全過程，分為間期與分裂期兩個階段。間期（interphase）分為三個階段：DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）與DNA合成後期（G2期） M期（mitosis）即細胞分裂期，分為：前期，中期，後期和末期。細胞週期的調節主要是通過G1期的阻留而實現的，G0期即指細胞處於阻留的狀態。細胞通過M期一分為二，有的可繼續分裂進行週期循環，有的轉入G0期。G0期是脱離細胞週期暫時停止分裂的一個階段。但在一定的刺激下，又可進入細胞週期，合成DNA並進行分裂。G0期的特點為：①未受刺激的G0細胞，DNA合成與細胞分裂的潛力仍然存在; ②當G0細胞受到刺激而增殖時，又能合成DNA並進行細胞分裂。細胞週期的調節主要是通過G1期的阻留而實現的，G0期即指細胞處於阻留的狀態。細胞通過M期一分為二，有的可繼續分裂進行週期循環，有的轉入G0期。G0期是脱離細胞週期暫時停止分裂的一個階段。但在一定的刺激下，又可進入細胞週期，合成DNA並進行分裂。

技術原理PI染色-流式細胞術檢測細胞週期的原理：碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一種可以嵌合到雙鏈DNA和RNA的鹼基對中並與之結合的熒光染料，無鹼基特異性。PI與雙鏈DNA結合後可以產生熒光，並且熒光強度和雙鏈DNA的含量成正比。細胞內的DNA被PI染色後，可以用流式細胞儀對細胞進行DNA含量測定，然後根據DNA含量的分佈情況，可以進行細胞週期的分析。由於細胞週期各時相的DNA 含量不同,通常正常細胞的G1/ G0期具有二倍體細胞的DNA含量(2N) ,而G2/ M期具有四倍體細胞的DNA 含量(4N) ,而S期的DNA 含量介於二倍體和四倍體之間。PI可以與DNA結合，其熒光強度直接反映細胞內DNA的含量。因此,通過流式細胞儀結合PI染色法對細胞內DNA含量進行檢測時,可以將細胞週期各時相區分為G1/G0期、S期和G2/M 期,獲得的流式直方圖對應的各細胞週期可通過特殊軟件計算各時相的細胞百分率。結果示例參考文獻： A. https://ibook.antpedia.com/z/93690.html B,C. Xie, Kewei et al. “Yes-associated protein regulates podocyte cell cycle re-entry and dedifferentiation in adriamycin-induced nephropathy.” Cell death & disease vol. 10,12 915. 4 Dec. 2019, doi:10.1038/s41419-019-2139-3​