細胞毒性檢測的原理及方法—源井生物_風聞

毒性檢測

細胞毒性（cell cytotoxicity）是由細胞或化學物質引起的單純細胞殺傷事件，不依賴於凋亡或壞死的細胞死亡機理。有時需要進行特定物質細胞毒性的檢測，比如藥物篩選。技術原理正常細胞代謝旺盛，其線粒體內的琥珀酸脱氫酶，可將四唑鹽類物質（如 MTT、XTT、WST-1和WST-8等 ）還原為紫色結晶狀物質，沉積在細胞周圍，然後通過酶標儀讀取OD值，從而檢測到細胞增值狀態。 Cell Counting Kit-8（簡稱CCK-8）是一種基於WST-8（Water Soluble Tetrazolium-8）而廣泛應用於細胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒，可用於簡便而準確的細胞毒性分析。 其基本原理為：WST-8【化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）的作用下被細胞中的脱氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產物（Formazan dye）。生成的甲瓚物的數量與活細胞的數量成正比。因此可利用這一特性直接進行細胞毒性分析。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。對於同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數目呈線性關係。結果示例參考文獻 Liu, Qing-Hua et al. “Reduced expression of annexin A1 promotes gemcitabine and 5-fluorouracil drug resistance of human pancreatic cancer.” Investigational new drugs vol. 38,2 (2020): 350-359. doi:10.1007/s10637-019-00785-5服務週期及結果檢測細胞毒性的其他方法