用AAV病毒在體內長期表達雙抗，可作為通用型CAR-T的替代方案_風聞

大多數藥物是間歇性給藥，這會導致藥代動力學高峯和低谷。尤其是那些半衰期短的藥物，需要頻繁給藥，這種低谷對於癌症治療來説是一個特殊的挑戰，會導致癌症的復發和耐藥性的出現。而且，頻繁給藥本身對患者來説也非常麻煩，可能需要頻繁前往醫院進行，而且可能導致額外的感染風險。癌症、心血管疾病和慢性疼痛等疾病需要長期治療，而風濕病等其他疾病需要長期間歇治療。      近年來，基因療法在治療單基因突變遺傳疾病領域取得了實質性突破，能夠將外源基因在患者體內穩定持續表達數月乃至數年時間。那麼，可否利用基因療法單次給藥持續穩定表達治療性蛋白的特點來解決蛋白類藥物的藥代動力學的高峯和低谷問題？      近日，美國全國兒童醫院的研究人員在 Science 子刊 Science Advances 上發表了題為：Leveraging gene therapy to achieve long-term continuous or controllable expression of biotherapeutics 的研究論文。該研究使用腺相關病毒（AAV）來表達雙特異性抗體（CD19×CD3），從而解決了雙特異性抗體需要反覆多次給藥的缺點和 CAR-T 療法生產流程繁瑣、需要個性化定製的缺點，實現了一次給藥，長期穩定表達治療性雙抗，可作為通用型 CAR-T 療法的替代方案。此外，該研究還開發了誘導型版本，利用外顯子跳躍技術，可實現按需表達、重複表達。

Blinatumomab，是CD19×CD3 雙特異性抗體，已被美國食品和藥品監督管理局（FDA）批准用於治療兒童和成人B細胞急性淋巴細胞白血病。但 Blinatumomab 的半衰期較短，僅為2.1小時，需要在2-6個月的時間內進行多次靜脈輸注。      在這項研究中，研究團隊構建了一個重組腺相關病毒（rAAV），用於表達 Blinatumomab，研究團隊發現，在其N端添加 secrecon 信號肽能夠顯著改變蛋白的分泌，研究團隊將 AAV 病毒產生的這一分泌蛋白產物命名為 αCD19-αCD3 二聚體。講這種解決方案成為 TransJoin。

進一步動物實驗顯示，只需要單次注射，AAV 就能長期表達治療性的 αCD19-αCD3 二聚體超過一年時間，實現對腫瘤的長期治療，顯著延長了淋巴瘤小鼠模型的生存期。這一長期治療效果與 CAR-T 細胞療法接近。而與 CAR-T 療法不同的是，TransJoin 是一種現貨即用型解決方案，避免了 CAR-T 療法繁瑣的生產流程及昂貴的成本。

此外，考慮到有些疾病只需要短期治療，或需要多次、間歇性治療。研究團隊還開發名為 TransSkip 的誘導性二聚體技術。將癌基因  KRAS 基因的1號外顯子插入到 CD19 編碼序列中，這會導致 AAV 表達出無功能的蛋白，而在使用 Morpholino 後，會造成外顯子跳躍，從而讓 AAV 表達出全長的 αCD19-αCD3 二聚體。同時，這種外顯子跳躍還會導致抑制癌基因 KRAS 的表達。

這種誘導型的 TransSkip，能夠在 AAV 注射後實現按需表達和多次反覆表達，對於癌症以外的其他疾病類型，可進行短期治療或間歇性多次反覆治療。      總的來説，該研究使用腺相關病毒（AAV）來表達雙特異性抗體（CD19×CD3），從而解決了雙特異性抗體需要反覆多次給藥的缺點和 CAR-T 療法生產流程繁瑣、需要個性化定製的缺點，可作為通用型 CAR-T 療法的替代方案。論文鏈接：https://www.science.org/doi/10.1126/sciadv.abm1890來源於公眾號：生物世界