基因敲除細胞系構建服務：助力精準探索與技術創新_風聞

隨着基因組學和分子生物學的快速發展，基因敲除技術已成為探索基因功能、研究疾病機制和開發新藥的重要工具。基因**敲除細胞**系作為該技術的核心產品之一，廣泛應用於學術研究、藥物篩選及疾病模型的構建等領域。今天就為大家分享一下基因敲除細胞系構建流程。

基因敲除細胞系的概念

基因敲除細胞系是指通過基因編輯技術（如CRISPR/Cas9、RNA干擾等）將特定基因從細胞的基因組中完全去除或失活，生成的細胞系。通過敲除目標基因，研究人員可以研究該基因在細胞功能、發育、疾病發生以及藥物反應等方面的作用。

基因敲除細胞系構建的技術流程

1. 目標基因選擇與設計敲除策略並製備敲除載體

2. 轉染或轉導

3. 篩選與驗證

4. 單克隆篩選

5. 基因敲除驗證

基因敲除細胞應用

敲除細胞作為重要的研究模型，廣泛應用於探究基因功能、疾病機制和藥物靶點篩選。通過模擬基因缺失對細胞行為的影響，可以揭示特定基因在生物學過程中的作用以及它們在疾病發展中的關鍵性。

基因敲除（KO）細胞系正是CRISPR/Cas9介導基因編輯中最典型的應用之一。以下是KO細胞系的主要應用方向：

抗體特異性驗證抗體是生命科學中使用最廣泛的試劑之一，但目前缺少統一的特異性驗證標準。未驗證的抗體容易產生非特異性結果，影響實驗可重複性。KO細胞系可作為抗體特異性驗證的重要工具，通過與野生型細胞平行對照，為試劑質量把關。未來，KO細胞繫有望成為抗體驗證的行業標準。

確定參與通路的基因一條信號通路通常涉及多個分子與過程。基因敲除細胞可用於驗證特定基因或突變的功能。例如，JAK1基因在細胞因子信號傳導和腫瘤轉移中發揮關鍵作用。敲除JAK1後，STAT磷酸化水平可通過Western blot檢測是否發生變化，從而確定其在信號轉導過程中的作用。

確定藥物靶點研究通路中基因功能常用藥理學干預結合基因編輯的方法。以6-硫鳥嘌呤（6-TG）為例，該藥物依賴DNA錯配修復（MMR）系統發揮作用。通過HPRT和目標基因的聯合敲除，可篩選6-TG的耐藥性細胞，進而驗證藥物作用機制及潛在靶點。

建立疾病模型基因敲除（KO）細胞系是通過基因編輯技術刪除或失活特定基因，幫助研究人員深入理解基因在細胞功能、發育以及疾病中的作用。在疾病模型的建立中，KO細胞系提供了一個強大的工具，能夠模擬特定的基因缺失或突變，進而幫助研究疾病的分子機制，開發新藥，甚至測試治療方案。

開發治療工具近年來，多個基因編輯臨牀試驗相繼展開。包括基於基因敲除的CAR-T細胞、敲除BCL11A增強子提升γ球蛋白表達，用於治療鐮刀狀細胞病和β-地中海貧血。目前，已有多項臨牀試驗嘗試敲除T細胞PD-1基因，應用於前列腺癌、食管癌、腎細胞癌等治療，這些試驗被視為體外CRISPR/Cas9基因敲除技術在癌症治療中概念驗證的重要突破。

源井生物的優勢

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源井生物是一家專注於基因編輯、細胞生物學技術和抗體驗證的全球高科技企業。廣州科學城擁有3000多平方米的先進實驗室，為40多個國家的科學家提供尖端的解決方案。

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